还原型谷胱甘肽（Glutathione），化学名称为 N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸，分子式为 C10H17N3O6S，分子量为 307.33，它溶于水、稀醇、液氨和甲基甲酰胺，而不溶于醇、醚和丙酮。谷胱甘肽（glutathione，r-glutamyl cysteingl +glycine，GSH）是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，存在于几乎身体的每一个细胞。谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用、整合解毒作用。半胱氨酸上的巯基为其活性基团（故常简写为 G-SH），易与某些药物、毒素等结合，使其具有整合解毒作用。谷胱甘肽不仅可用于药物，更可作为功能性食品的基料，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。谷胱甘肽有还原型（G-SH）和氧化型（G-S-S-G）两种形式，在生理条件下以还原型谷胱甘肽占绝大多数。
标本收集与试剂准备:
1. 血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可) ，血清、血浆 避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明。细胞培养液、上清样品收集：取细胞 培养上清液 500ul，4 度，6000rpm 离心5-10min；取上清。 组织样品收集：将组织块用 PBS 漂洗干净，制成匀浆液，4 度离心(3500r/min,30min) 取上清液。待测样本应尽早检测，2-8℃保存 48 小时；更长时间须冷冻(-20℃或-80℃)保存，避免反复冻融。
2. 标准品/样品稀释液 (1×) 的配置：1ml 标准品/样品稀释液(10×) +9ml 去离子水。
3. 标准品配制：取 8 个 1.5ml 离心管，分别标注 S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7, blank,每管中各加入标准品/样品稀释液（1X）100ul,第一管 S1 中再加入标准品（5mg/ml)100ul,置于旋涡混合器上混匀后用加样器吸 100ul，移至第二管，如此反复作对倍稀释，从第七管（S7)中吸出 100ul 弃去，第八管为空白对照。
4. 样品的准备：取和检测样品相同数量的 1.5ml 离心管并编号，每管中分别加入对应检测样品 100ul。
5. 如果检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建 议做预实验， 以确定稀释倍数)。
检测程序:
1. 加提取液：将配置/分装好的标准品及待测样品放入 1.5ml 离心管架(1.5ml 双面板)上，每管中分别各 加入提取液 100ul，震荡混匀后，室温静置10 分钟。
2. 加显色液：每孔加入显色液 400ul，混匀后室温静置反应10 分钟，将反应好的样品，8000 转离心 1 分 钟，取上清 100ul 对应加入微孔板中，(如检测样品澄清也可以不离心，直接取上清) 。
3. 加 GSH 还原酶：在加好标准品及样品的微孔板中，每孔再加入GSH 还原酶100ul，混匀后室温静置反应 5 分钟。
4. 读 数：将反应好的微孔板 30 分钟内用酶标仪在 412nm 处读OD 值。
结果判断与计算：
1.所有 OD 值建议减除空白孔值后再进行计算，如空白孔 OD 低于0.1，也可以直接计算。
2.以标准品浓度作横坐标，OD 值作纵坐标，手工绘制或用软件绘制标准曲线，根据样品OD值计算出相应含量，再乘以稀释倍数即可。
