游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸（nonestesterified fatty acid NEFA），血清中含量很少，如用小量血清标本测定必须采用灵敏的方法，并要避免脂肪水解产生的脂肪酸的干扰。NEFA 是由油酸，软脂酸，亚油酸等组成，大部分游离脂肪酸与白蛋白结合，存在于血液中。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。

标本处理：

1. 血清（浆）：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。

2. 培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10-15 分钟，取上清测定。

3. 组织样本：准确称取组织重量，按重量（g）:体积（ml）=1:9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下匀浆，25000 转/分，离心 10-15 分钟，取上清测定.

4. 细胞样本：

a. 细胞收集：将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，离心 10-15 分钟，弃上清液，取细胞沉淀；用等渗缓冲液（推荐 0.1mol/L、PH7-7.4 磷酸盐缓冲液）清洗 1-2 次，同样 1000 转/分，离心10-15 分钟，弃上清液，取细胞沉淀。

b. 细胞破碎：采用裂解液裂解，裂解好的液体不离心直接测定。 试剂的配制

试剂一： 氯仿（三氢甲烷），自备。

试剂二： 缓冲液，40ml × 1 瓶，室温保存 6 个月。

试剂三： 铜试剂，甲液 30ml ×1 瓶，乙液 30ml ×1 瓶，丙液 5ml ×1 瓶，4℃保存 6 个月。试剂三铜试剂的配制：甲液：乙夜：丙夜=10：9：1 的比例进行配制，按需配制，配制好后可 4℃保存 2 周。

试剂四： 显色剂，粉剂×2 支，稀释液 10ml ×2 瓶，4℃保存 3 个月。试剂四的配制：临用时蒋1 支粉剂溶解于1 瓶 10ml 稀释液中，配制好后可 4℃保存 2 周。

试剂五： 棕榈酸标准品粉剂×2 支，溶剂 50ml ×1 瓶，4℃保存 3 个月。1000umol/L 棕榈酸标准品的配制：将一支粉剂用溶剂溶解后定容至 20ml（注意用溶剂将装粉剂的离心管洗净）。

试剂六：蒸馏水 40ml ×1 瓶.