过氧化物酶（Peroxidase，POD）是氧化还原酶的一种，是过氧化物酶体的标志酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢，氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用，过氧化物酶（Peroxidase，POD）检测对于临床诊断及疾病发展和疗效监控也具有很大的意义。
标本收集与试剂准备:
1. 血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可)，血清、血浆 避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明。细胞培养液、上清样品收集：取细胞培养上清液 500ul，4 度，6000rpm 离心5-10min；取上清。组织样品收集：将组织块用 PBS 漂洗干净，称取约 0.1g 组织，加入1mL 提取液，进行冰浴匀浆，5000g4℃离心 15 分钟，取上清，置冰上待测，待测样本应尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃以下）保存，避免反复冻融。
2. 标准品/样品稀释液 (1×) 的配置：1ml 标准品/样品稀释液(10×)+9ml 去离子水。
3. 显色液的配置：显色液 B 按 1:100 加入显色液 A 中，即完成显色液的配置，显色前10分钟配置。
4. 标准品配制：取 8 个 1.5ml 离心管，分别标注 S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7, blank,每管中各加入标准品/样品稀释液（1×）200ul，第一管 S1 中再加入标准品（10000U/L）200ul，置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸 200ul，移至第二管，如此反复作对倍稀释，从第七管（S7）中吸出 200ul 弃去，第八管为空白对照。
5. 如果检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。
检测程序:
1. 加 样：微孔板中分别对应加入配置好的标准品及待测样品10ul。
2. 加显色液：每孔加入配置好的显色液 190ul，室温静置反应10 分钟。
3. 读 数：将反应好的微孔板用酶标仪在 470nm 处读 OD 值。
结果判断与计算：
1.测量出 OD 值后根据标准曲线进行计算。
2.以标准品浓度作横坐标，OD 值作纵坐标，手工绘制或用软件绘制标准曲线，根据样品OD值计算出相应含量，再乘以稀释倍数即可。
